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    影響ELISA試劑盒測定成果的解決辦法
  • 發(fā)布日期:2024-06-06      瀏覽次數:72
    • 一、類(lèi)風(fēng)濕因子
      人血清中IgM、IgG型類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)能夠與ELISA系統中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合,然后導致假陽(yáng)性。
      解決辦法:
      1.用F(ab)2替代完好的IgG;
      2.標本用聯(lián)有熱變性(63℃,10 min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有用);
      3.檢測抗原時(shí),能夠用2-巰基yi醇等加入到標本稀釋液中,使RF降解。
      二、補體
      ELISA系統中固相一抗和符號二抗過(guò)程中,抗體分子發(fā)作變構,其FC段的補體C1q分子結合位點(diǎn)被暴露出來(lái),使C1q 能夠將二者連接起來(lái),然后形成假陽(yáng)性。
      解決辦法:
      1.用EDTA稀釋標本;
      2.用53℃,10 min或56℃,30 min加熱血清使C1q滅活。
      三、嗜異性抗體
      人類(lèi)血清中含有能與嚙齒類(lèi)動(dòng)物(如鼠等)Ig(s) 結合的天然嗜異性抗體,可將ELISA系統中一抗和二抗連接起來(lái),也能形成假陽(yáng)性。
      解決辦法:
      可在標本稀釋液中加入過(guò)量的動(dòng)物Ig(s),但加入量不足或亞類(lèi)不同時(shí)無(wú)效。
      四、嗜靶抗原的本身抗體
      抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的本身抗體,有時(shí)能與靶抗原結合形成復合物,在ELISA方法中均可干擾抗原抗體測定成果。
      解決辦法:
      測定前需用理化方法將其解離后再測定。

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